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在生物相关的研究实验中,研究人员经常需要对DNA进行提取分析以便快速有效地判断生物种类,对基因组织成分进行深入分析。如何从细胞中提取DNA且不破坏结构,这就需要到蛋白酶K的帮助,它能有效分解细胞当中的所有蛋白质,将细胞核中的DNA完整释放。
蛋白酶K结构图|来源于网络
蛋白酶K(Proteinase K)是从真菌林伯氏白色念球菌中分离出的高活性丝氨酸蛋白酶,是现有蛋白酶中活性较高的品种,pH活性范围为4-12,温度范围达0-75℃,甚至在SDS、尿素或EDTA存在的情况下依旧保持活性。它切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键,可以降解所有蛋白质。
蛋白酶K可作用于多种蛋白,在临床实践中,利用蛋白酶K进行标本的预处理,提高核酸提取效率,从而提高阳性标本检出率是常用的方法。在病毒核酸提取检测中发挥着多重作用:裂解病毒的外壳蛋白,暴露核酸分子;降解与核酸紧密结合的组蛋白;防止病毒RNA的降解等。
尤其是应对复杂样本,诸如痰液样本,其中存在着一些可抑制PCR反应物(如糖蛋白,免疫球蛋白等物质就是PCR的抑制物),使用了蛋白酶K可较大程度清除该类物质,保证PCR结果准确性;同时样本中可能残留较多的RNA酶,蛋白酶K即可大程度灭活RNA酶,防止病毒RNA的降解。
本产品来源于表达经过定点突变优化的林伯氏白色念球菌(Engyodontium album)蛋白酶K基因的毕赤酵母,具有比活性高、产量高及更广的温度/pH值活性范围等优势。先进的蛋白质工程技术及28,000升酵母平台有效单位成本,为生物医药研发与生产提供高性价比的蛋白酶K。酵母高效表达和色谱纯化保证了产品的纯度,本产品不含细菌内毒素,应用范围比天然蛋白酶K更广泛。
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去除核酸酶和其它蛋白污染:应用于基因诊断试剂盒、基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中。
生物制药工业:提取核酸、多糖类药物等非蛋白类生物制品,例如DNA疫苗和肝素的制备。
化妆品领域:可用于皮肤保健去除老化角质层细胞以及鞣皮。
日用工业领域:制备水解蛋白调味品、饲料加工等行业领域。
结语:蛋白酶K应用范围广泛,除了医疗诊断及科研领域,它在其他行业也有着独特作用:如造纸、工业制革、饲料生产、食品加工、化妆品等行业。看了以上介绍,您是否对蛋白酶K有所了解了呢~